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NK細(xì)胞活化擴(kuò)增方法,Corning版

更新時(shí)間:2018-02-08 點(diǎn)擊次數(shù):2124

NK 細(xì)胞活化

  1.  熱滅活自體血漿,56°C,30min。離心, 800 xg , 20 min,去除沉淀。4°C 保存上清血漿,培養(yǎng)備用。
  2.  至少5倍體積的PBS(不含鈣鎂)清洗PBMCs。室溫離心500xg,10min,收集PBMCs。 PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL,使用NK活化培養(yǎng)基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
  3. 預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶使用前,用PBS(不含鈣鎂)清洗兩次。添加30 mL PBMC懸液到預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶,37°C,5% CO2培養(yǎng)。

注意:第六天之前,如果培養(yǎng)基變黃,細(xì)胞密度超過(guò)2.0 x 106 cells/mL,需要添加新鮮的NK活化培養(yǎng)基配比10%自體血漿,保持細(xì)胞密度在在5 x 105 2.0 x 106 cells/mL之間。

NK細(xì)胞擴(kuò)增

  1.  培養(yǎng)第六天,培養(yǎng)液離心,適量NK擴(kuò)增培養(yǎng)基(1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿)重懸細(xì)胞,再轉(zhuǎn)移到T-225培養(yǎng)瓶或透氣細(xì)胞培養(yǎng)袋。
  2. 每隔兩三天,根據(jù)細(xì)胞擴(kuò)增狀態(tài),培養(yǎng)體系中添加新鮮的NK擴(kuò)增培養(yǎng)基(1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿)保持細(xì)胞密度在5 x 105 2.0 x 106 cells/mL之間。
  3.  細(xì)胞總量到達(dá)2 x 109 收獲細(xì)胞用于CCK8 殺傷力和免疫表型檢測(cè)。

注意:整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,細(xì)胞懸液吹打和培養(yǎng)容器拍打都要輕柔,以避免細(xì)胞損傷,保持細(xì)胞活性。

 

Corning® NK細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)套裝

英文名:Corning® NK Expansion Kit

中文名:Corning® NK細(xì)胞活化/擴(kuò)增培養(yǎng)套裝

 

應(yīng)用:NK細(xì)胞活化擴(kuò)增

品牌產(chǎn)地:美國(guó)Corning

保存:2°C - 8°C

 

NK細(xì)胞是當(dāng)今免疫治療常用的細(xì)胞。但是NK細(xì)胞培養(yǎng)操作難度大,對(duì)培養(yǎng)條件、培養(yǎng)技術(shù)要求很高,難以獲得高純度能的活性細(xì)胞。 Corning NK細(xì)胞活化/擴(kuò)增培養(yǎng)基套裝由多個(gè)組分組成,為 NK細(xì)胞培養(yǎng)提供簡(jiǎn)便的操作方案。使用該套裝所獲得細(xì)胞數(shù)量產(chǎn)量高,活性高,具有很高的殺傷效應(yīng)。

產(chǎn)品組成

NK細(xì)胞活化培養(yǎng)基

NK細(xì)胞活化添加劑

NK細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基

抗體預(yù)包被T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞培養(yǎng)袋

 

產(chǎn)品特色

擴(kuò)增能力強(qiáng),在14天內(nèi)可達(dá)到100倍擴(kuò)增

效應(yīng)細(xì)胞比例高,可達(dá)80%

操作方便

 

產(chǎn)品訂購(gòu)信息

 

品牌

貨號(hào)

產(chǎn)品描述

包裝

Corning

88-570-kit

NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells

NK細(xì)胞活化/擴(kuò)增培養(yǎng)基套裝

1Kit

套裝包含

活化用

Pre-coated T-75 flask 抗體預(yù)包被T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶

1瓶

NK primary medium NK細(xì)胞活化培養(yǎng)基

1×50 mL

NK primary supplement NK細(xì)胞活化添加劑

1×1.8 mL

擴(kuò)增用

Expansion medium NK細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)基

1×1000 mL

配件

細(xì)胞培養(yǎng)袋

1 x 640 cm2

 

 

 

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